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细胞免疫的功能检测方法与诊断

更新时间:2017-02-10 14:46:40 阅读1
细胞免疫的功能检测方法与诊断

  1.白细胞移动抑制试验 被精子抗原致敏的淋巴细胞,在被精子抗原激活时,可释放出可溶性的淋巴因子使白细胞移动速度减慢。该法可作为测定精子抗原的细胞免疫方法,是免疫不育的辅助诊断手段。

  2.白细胞黏附抑制试验 正常人外周血液中的白细胞,在一定条件下,能黏附于清洁的玻璃表面。在精子抗原作用后,被致敏淋巴细胞的黏附能力明显下降,出现黏附抑制现象。免疫性不育正患者黏附抑制指数升高。

  3.淋巴细胞转化试验 一般采用H-TdB掺入法,该法阳性率与凝集AsAb阳性率明显相关,可检测T细胞和B细胞功能,对诊断免疫性不育帮助较大。

  4.外周血白细胞促凝血活性测定 其作用原理是致敏淋巴细胞再次与抗原(如精子、精浆)接触时可被激活,产生一种可溶性介质,此介质能诱导单核细胞产生结核在细胞膜上的促凝血活性因子,从而引起血凝固加速。但该法结果与AsAb结果并不完全一致。

  5.花环试验 采用T花环试验和活性花环试验分别测定了T细胞和活性T细胞数目,发现免疫性不育者两者均明显下降。

细胞免疫的功能检测方法与诊断

睾丸免疫病理诊断

  睾丸具有抗原性,有精子发生的睾丸,从精母细胞、精子细胞直至精子均具有特异的抗原性,免疫学研究证明生精小管基膜也有很强的抗原性,注射生精小管基膜提取物可造成无精子症。生精小管基膜和肾小球基膜,颌下腺腺泡基膜有一定的交叉反应。用睾丸匀浆主动免疫法在8种哺乳动物可引起自身免疫性无精子症。这是一种变应性睾丸炎。在服用棉酚引起的不可逆性生精障碍病理的睾丸活检中,发现生精小管基膜有很多免疫复合物沉积,并认为这可能是不可逆生精障碍的主要原因。因此免疫不育不仅和血循环中抗精子抗体、局部体液中抗精子抗体与精子表面的抗精子抗体有关,而且也可能与生精小管中基膜抗体有关。

  睾丸免疫病理一般是在睾丸活检基础上进行的。最简单方法是观察睾丸各部位有淋巴细胞浸润,有的限于间质淋巴浸润,可分弥散性或密集成团型浸润,有的则浸润到生精小管管腔中;一般则应按照免疫病理要求进行荧光标记,然后再荧光显微镜下观察免疫荧光存在的部位和免疫荧光的强弱以确立免疫反应之强弱;也可采用免疫电镜技术重点观察免疫复合物的沉积,特别是观察生精小管基膜上的免疫复合物沉积。

免疫检测结果评估

  如上所述,诊断男性免疫不育主要可采用抗精子抗体、细胞免疫、精浆免疫抑制因子测试及睾丸免疫病理等检测方法;其睾丸免疫病理检查是在睾丸活检基础上进行,属于一种创伤性检查方法,所以一般不作为常规诊断方法。另外由于灵敏度不高及免疫不育相关紧密度不够等原因,细胞免疫和精浆免疫检测也未作为男性免疫不育的常规诊断方法,在临床上常用的还是抗精子抗体检测方法。

  抗精子抗体检测方法甚多,世界卫生组织WHO 推荐免疫珠方法(IB)和混合凝集反应(MAR)为免疫不育的抗精子抗体检测方法。2000年WHO关于免疫不育的诊断标准Wie:性及射精功能正常,在至少一份精液标本,用MAR或IB 方法,有不少于50%活动精子表面有抗精子抗体。在决定采用何种方法治疗前需通过附加试验确认抗体的生物学重要性。精子-宫颈黏液相互作用试验,包括体外的精子-宫颈黏液接触试验或体内性交试验可作为抗精子抗体的生物学重要性功能试验。

  在血清抗精子抗体,精浆抗精子抗体和宫颈黏液的抗精子抗体中,后两者属生殖局部抗体具有重要性,另体液中抗精子抗体要注意滴度水平,一般认为滴度高对生育力有较大影响,因此应尽可能选择能进行定量分析法。

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