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精子功能的检测

更新时间:2017-01-25 21:00:57 阅读0
精子功能的检测

  有一系列精子功能检测方法可供选择,但应当指出,这些精子功能检测方法还是相对的;真正反映精子功能的测试方法还有待建立。

一、目的意义

  精子尾部低渗膨胀试验(HOS)可作为体外精子膜功能及完整性的指标,以估测精子潜在的受精能力。

  任何一种细胞的生存离不开物质交换新陈代谢,都与细胞膜有关,要靠细胞膜来完成。精子运动、精子的顶体反应、精子穿透透明带、精卵融合等一系列受精活动都与精子膜的功能有直接关系。近年来的许多实验菌证实了精子尾部低渗膨胀试验可直接反映精子整体的功能状态。且精子尾部是精子的运动器官,因而尾部膨胀率与精子活动率、存活率呈明显之正相关。

  精子尾部低渗膨胀试验,方法简便,易于掌握及观察。

精子功能的检测

二、试验材料与方法

  1.原理:处于低渗溶液中的精子,必定重广元立精子内外液体间的平衡,此时水分子通过精子膜进入精子,使精子体积增大而膨胀。这是细胞膜功能的正常表现,是细胞具有完整的功能活动的指征。

  在低渗溶液中,精子尾部的膨胀容易观察,且根据不同形态可以统计其膨胀率,试验证实,精子尾部的低渗膨胀率可以反映精子膜完整功能活动。

  2.实验器具:相差显微镜一台;载玻片;盖玻片22mmx22mm;吸管;滴管;小试管10mmx10mm;37°C恒温箱;水浴箱;小试管架。

  3.主要试剂:果糖;枸缘酸钠。

  4.溶液配制

  HOS溶液:枸缘酸钠7.35g,果糖13.51g。蒸馏水加至1 000ml。

  5.试验步骤

  (1)将精液标本放入37°C水浴箱中液化。

  (2)吸取1.0ml HOS溶液入小试管中置37°C恒温孵育箱内预温5min。

  (3)吸取0.1ml已液化的精液标本,加入已预温的HOS溶液,充分混匀后,再放入37°C恒温孵育箱孵育30min。

  (4)吸取已孵育好的标本,滴1滴于载玻片上,加盖玻片。

  (5)用相差显微镜,在放大400倍下观察精子尾部膨胀情况(如精子涂片用铁苏木精复染,也可在普通显微镜下观察)。

  (6)计数100个精子,算出精子尾部膨胀率。

  6.结果分析

  精子尾部低渗膨胀百分率>60%为正常;精子尾部低渗膨胀百分率<49%不正常;精子尾部低渗膨胀百分率59%-50%为可疑。

  应当指出HOS试验阳性者提示精子膜受到严重损害,可能精子已经死亡,故这项试验可能并不能作为精子功能测试的理想选择,但目前应用仍较普遍。

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